复合肥新行标在2021年6月1日即将执行,目前已引起国内复合肥行业的极大关注,新行标要求增效剂只要在包装上标准,就必须能够检测。该要求貌似不高,但目前肥料企业的主流检测技术能够精准检测难度很大,未来复合肥的包装袋上哪些增效剂能够标注?如何开发相对精准的检测标准让企业添加的增效剂“光明正大”的在包装上标注?哪些新型的检测技术能够助力复肥生产企业制定标准?在人体健康和食品领域常用的酶联免疫法和在生物医药(中药)领域广泛应用的“指纹图谱”分析评价法未来会在肥料中增效剂(生物刺激素)的检测标准制订方面发挥巨大作用。
一、酶联免疫法简介
1、酶联免疫吸附实验基本原理:使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性;使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本和酶标抗原或抗体按相应步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅来进行定性或定量分析。
图1 酶联免疫示意图
图2 酶联吸附反应实验
2、酶联免疫吸附试验法以其灵敏度高(可达ng 甚至pg 水平),特异性强、速度快和成本低等优点,可以高通量的对大量样品进行常规分析;能够用于样品的定性筛选,也能够对样品进行定量测定,以确定样品中待测组分含量。
图3 酶联免疫标准曲线
3、酶联免疫吸附实验在生命科学各领域得到广泛应用,它已迈出医药、临床领域,步入农业、渔业、畜牧业和食品加工业。
图4 酶联免疫在农业中的应用
二、指纹图谱分析方法简介
1、指纹图谱是一种综合的,可量化的鉴定手段,是建立在中药化学成分系统研究的基础上,主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。
图5 指纹图谱延伸
2、指纹图谱的研究将近代分离手段和仪器分析技术应用于中药的质量控制,目的在于建立一种新的质量控制方法,是一种具有创新性的研究工作。
图6 山银花指纹图谱叠加图
3、针对中药指纹图谱的研究,新型天然产物产业化生产可以应用指纹图谱结合相似度计算软件,识别生产工艺关键控制点,保证产品质量。
图7 肥料增效剂(内生真菌提取物)标准指纹图谱
4、指纹图谱分析方法已经具备在肥料增效剂定性定量分析中大量应用的技术基础,尤其是以生物刺激素为代表的既是有机物又是混合物的物质的分析和质量控制。
因受笔者水平及视角所限,观点及说法定有不足之处,欢迎业内人士批评指正。